企业等级: | 普通会员 |
经营模式: | 商业服务 |
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发布时间:2022-09-05 19:12:00 作者:山东康德莱净化
PCR管
(1)渗漏密闭性:将n个PCR管加入半量墨汁,盖好盖子后放入水中,浸泡30min,没有墨汁渗出为合格。
(2)离心密闭性:将n个PCR管加入半量纯水,放入离心机,1000 rpm,30min,管盖未崩开未漏液为合格。
(3)热密闭性:将n个PCR管加入半量纯水,盖好盖子称重后放入PCR仪,设置一个常用的PCR程序,程序运行完毕后,再进行称重,PCR管未变形,管盖未崩开未漏液,前后重量未变化为合格。
(4)冷密闭性:将n个PCR管加入半量纯水,放入-20℃冰箱,24h,离心管未变形,管盖未崩开未漏液为合格。
(5)污染物质检:将n个PCR管加入半量阴性纯水,盖好盖子涡旋1 min后静置5min,作为模板进行扩增,qPCR无扩增为合格。
(6)抑制物质检:将n个PCR管分别加入弱阳性质控物,室温静置5min,然后进行提取;RNA核酸,DNA核酸,室温静置5min,作为模板进行扩增,qPCR扩增未被抑制为合格。
(7)空白荧光通透性:对于qPCR,需要考察PCR管是否有非特异性荧光信号,将n个空PCR管,盖好盖子后放入PCR仪,设置一个常用的PCR程序,程序运行完毕后,qPCR无扩增为合格。
(8)阳性荧光通透性:对于qPCR,还需要考察PCR管是否会抑制荧光的通透性,将n个含弱阳性样品和扩增试剂的PCR管,与确认无荧光干扰的PCR管,盖好盖子后放入PCR仪一同扩增,设置一个常用的PCR程序,程序运行完毕后,qPCR扩增未被抑制为合格。
PCR实验室的潜在污染来源
①临床标本中存在的大量待测微生物或待测靶核酸
②科研中得到的质粒
③以前分析研究的特定微生物或靶核酸
④大量存在于实验环境中的特定微生物或靶核酸
⑤以前扩增产物的残留污染,这也是 PCR 实验室产生的将造成假阳性的“污染”。
PCR扩增可以引起实验室中扩增产物的累积,通常一次典型的PCR
扩增可以产生109拷贝的靶序列,如果气溶胶化,甚至的气溶胶都会含有106拷贝的扩增产物。如果不加以控制,在短期内累积的气溶胶化的扩增产物即会污染实验室中的试剂、仪器设备和通风系统,从而造成严重的实验室“污染”,出现大量的假阳性结果。
pcr实验室院感管理
1.进入各工作区域应当按照单一方向进行,即试剂储存和准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析区。
2.各区域的设备、清洁用具标记明确,不得混用。
3.各区域的衣服用不同颜色标记,离开各区域时不得将工作服带出。
4.试验台用移动式紫外线灯消毒,高度60-90cm。扩增区延长照射时间,是过夜照射。同时各区域还需安装悬挂式紫外线灯管。
5.各试验区尽量避免不必要的走动和进出,减少风险。
6.扩增产物分析区可能会用到某些可致基因突变和有毒物质,应特别注意实验人员的安全防护。
净化车间工作状态
在一般情况下,高粉尘含量会致使干净度降低,而低粉尘含量容易导致洁净度。在净化车间的建设合同中,通常只会基本的空状态测试,而因时间紧迫,经常错过静态和动态测试。但仍建议承建商和业主在静态和动态条件下都对净化车间进行测试。可有效保证净化车间的建造符合相关设计要求。在静态和动态两种不同条件下的测试结果对比,分析净化车间存在的问题,并提供有效帮助。例如:在静态条件下,洁净度达标,但到了动态条件下,却超标。
因净化车间管理措施发生失误而致使:安装机器时,不标准的清洁,不恰当的清洁程序,不严格的纪律管理,不正确的机器放置位置(将回风口挡住,或对过滤器的送风阻断)等。因此,建议在空态和动态时,都要对净化车间进行测试。
所有的净化车间测试,基本都是基于国际认可标准上。 这些标准和实践为净化工厂的测试和认证提供了基本指导。事实上,净化车间的业主和承建商因产品,工艺要求对技术指标,测试方式,验收标准有着不同协议。因此,很多验收标准由净化车间的业主和承建商通过协商,并参考净化车间测试认证公司的建议达成协议。
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